Plant Cell:中科院储成才组研究水稻显性包穗突变体ree1-D (regulato
2016年3月14日，国际著名学术期刊《plant Cell》 杂志在线发表了题为“Rice HOX12 Regulates Panicle Exsertion by Directly Modulating the Expression of ELONGATED UPPERMOST INTERNODE1”的研究成果，为解决水稻杂交制种中不育系的包穗问题提供了很好的解决方案。中科院遗传发育所植物基因组学国家重点实验室高少培博士为论文第一作者，储成才研究员为通讯作者。该项研究得到国家自然科学基金委和科技部转基因专项的资助。
杂交水稻的发明和大规模应用不仅解决了中国人的吃饭问题，对世界减少饥饿也作出了卓越的贡献。杂交水稻的制种过程需要两个亲本材料——雄性不育系和恢复系，然而水稻不育系常常具有“包穗”(即抽穗期穗子被包裹在叶鞘内难以抽出)的特性，为杂交稻制种带来很大困难。研究表明最上部茎节内活性赤霉素水平的降低是导致不育系包穗的主要原因。生产上往往需要在后期大量喷施“九二零”(赤霉素)来克服杂交制种中不育系的包穗问题。然而，“九二零”的施用不仅大大增加了制种成本、降低杂交种质量并导致环境污染，而且其效果还很大程度上取决于喷施者的技术、施用时期及天气状况等。1981年，Rutger等首先发现水稻最上节间特异伸长突变体eui1，随后育种家利用eui1隐性突变基因来培育杂交水稻的高位茎节伸长不育系，以便于杂交稻的商业化制种。正是eui1具有解除不育系包穗的功效，因而，也被称为杂交水稻生产中除了不育系、保持系和恢复系外的第四遗传因子。
2006年，中国科学院上海生命科学研究院何祖华研究组和中国科学院遗传与发育生物学研究所储成才研究组分别通过图位克隆方法同时克隆了EUI1基因 (Zhu et al., Plant Cell, 2006;Luo et al., Plant Cell Physiol, 2006)。发现EUI1编码一个细胞色素P450单加氧酶，EUI1可使具有生物活性的赤霉素GA4失活。抑制EUI1的表达可提高水稻内源GA4 含量，从而增加其株高和穗颈长，但对EUI1的表达调控机理一直以来并不清楚。
该项研究通过对一个水稻显性包穗突变体ree1-D (regulator of EUI1) 的分析研究发现，HD-ZIP I类转录因子家族中的HOX12直接调控EUI1基因的表达，HOX12和EUI1基因均在水稻幼穗尤其是花药中高表达。生化分析表明，HOX12作为转录激活因子，可以在体内与EUI1启动子区直接结合并促进其表达，进而控制植物內源GA4的代谢和穗茎伸长。在水稻中，GA4比GA1有更高的生物活性。在水稻生殖生长阶段，GA4在花药及稻穗中大量积累。而EUI1可降解GA4，维持植物正常生长。HOX12干涉株系中EUI1基因表达量下降，使GA4降解减缓，并从穗中向穗茎中流动，进而导致穗茎中GA4含量增加，穗茎节变长。
图：在生殖生长阶段，高活性的赤霉素GA4在穗中积累。EUI1编码一个细胞色素P450单加氧酶，降解GA4。EUI1似一个开关控制着GA4从穗流向茎。HOX12直接调控EUI1表达。激活HOX12表达会提高EUI1活性，增强GA4降解。反之，降低HOX12表达会减弱EUI1活性，使GA4积累并从穗到茎流动，导致穗茎节伸长。
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原文摘要：
Bioactive gibberellins (GAs) are key endogenous regulators of plant growth. Previous work identified ELONGATED UPPERMOST INTERNODE1 (EUI1) as a GA deactivating enzyme which plays an important role in panicle exsertion in rice (Oryza sativa). However, the mechanism that controls EUI1 activity during development is still largely unexplored. In this study, we identified a dominant panicle enclosure mutant regulator of eui1 (ree1-D), which is caused by the activation of a homeodomain-leucine zipper transcription factor HOX12. Diminished HOX12 expression by RNA interference enhances the panicle exsertion, mimicking the eui1 phenotype. Quantification of GA levels in the uppermost internodes revealed that the HOX12 knockdown plants contain higher levels of the major biologically active GAs (such as GA1 and GA4) than these in the wild type. The expression of EUI1 is elevated in the ree1-D mutant but lowered in HOX12 knockdown plants. Interestingly, both HOX12 and EUI1 genes are predominantly expressed in panicles, where GA4 is highly accumulated. Yeast one-hybrid, electrophoretic mobility shift assay, and chromatin immunoprecipitation analyses showed that HOX12 physically interacts with EUI1 promoter both in vitro and in vivo. Furthermore, overexpression of HOX12 in eui1 mutant background remains the elongated uppermost internode phenotype. These results reveal a novel regulatory module that HOX12 acts directly through EUI1 to regulate panicle exsertion in rice.
作者：高少培
