番茄红素ε-环化酶果实特异性RNAi载体的构建及对番茄的遗传转化

为了研究番茄LCYE基因对其果实中番茄红素含量的影响机制，培育高品质番茄品种，在GenBank中根据已知的LCYE(ID: 544 129)扩增出337 bp的保守序列；根据KJ 561 284.1扩增出2 203 bp的果实特异性启动子E8；查找番茄LCYE的内含子，选择第三个长112 bp的Intron片段；利用同尾酶构建出载体pRiE8-LCYE，与pCAMBIA1301连接构建出果实特异性RNAi表达载体pCRiE8-LCYE，测序表明载体构建正确。农杆菌介导，叶盘法转化番茄，PCR检测表明得到了转基因番茄植株。与同样条件下番茄LCYB基因干扰载体的遗传转化过程相比，表明：对LCYE基因的干扰使番茄子叶开始褐化时间提前，且褐化率更高，说明筛选培养时子叶的褐化与所干扰的基因也有关系。