黄瓜叶片直接PCR扩增方法的建立

为了快速对黄瓜样品进行基于PCR的分子鉴定，本研究以我国华北型黄瓜品种“长春密刺”的幼嫩叶片为材料，通过筛选DNA聚合酶的种类、改变黄瓜叶片取样量以及扩增产物长度等条件，对叶片直接PCR的的体系进行了建立和验证。结果表明，普通Taq酶和Hiproof高保真酶对叶片直接PCR扩增的效果较好，与对照CTAB法提取的DNA相比，20、200和1 000 ul枪头的叶片取样量、不同GC含量(25-65%)和不同扩增长度的DNA模板对PCR扩增效果无明显差异；此体系也可用于黄瓜的茎、花、果实等组织部位上。该试验方法的建立及应用，省去了DNA体外提取过程，有助于提高基于黄瓜PCR基础上的分子检测效率。