农杆菌介导HaBADH基因转化马铃薯的研究

本研究以马铃薯(Solanum tuberosum L.)试管薯作为转化受体，利用农杆菌介导法将从梭梭中获得的甜菜碱醛脱氢酶基因(HaBADH)转化马铃薯，采用正交试验设计优化了影响马铃薯转化的4个主要因子，建立了农杆菌介导的马铃薯高效转化体系，获得了转基因植株。研究结果表明，转化过程中，浸染时间15min，菌液浓度OD600为1.0，筛选培养时卡那霉素浓度30 mg/L、品种为大西洋为最佳转化方案，抗性芽分化率最高达到了35.9%；4个因子中基因型对转化效率影响最大，菌液浓度的影响次之，卡那霉素浓度和浸染时间的影响最小。经PCR、RT-PCR及Southern blot检测，证明了HaBADH基因整合到马铃薯中，阳性转化率为45.3%。