丝瓜SRAP反应体系的优化

以丝瓜基因组DNA为模板，对SRAP反应中主要五个影响因素dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度、DNA模板浓度、Mg2+浓度进行优化，建立丝瓜SRAP-PCR反应的体系。根据实验确定的最佳反应体系为：25μL SRAP体系为：75ngDNA，0.2 mmol.L-1 dNTP，1.25U Taq酶， 0.16 umol.L-1的单条引物，2.0 mmol.L-1 Mg2+，2.5μL 10×Buffer。最终选用33个丝瓜品种进行所确立扩增体系及扩增程序进行验证，检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、亮度高、重复性好，表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于丝瓜的SRAP分子标记。