全基因组筛选确定了六个与大肠杆菌小菌素蛋白质二硫键异构酶(PDI)有关的基因

小菌素 PDI抑制不同致病性大肠杆菌菌株。BW25113菌株单基因敲除文库与E.coli25小菌素PDI共培养时,产生竞争性。确定了6个不敏感的突变位点:(ΔatpA, ΔatpF, ΔdsbA, ΔdsbB, ΔompF, 和 ΔompR。

大肠杆菌O157中通过敲除H7 Sakai确认了这6个基因之间丢失或者修复敏感性可以互补。

大肠杆菌的ompF异源表达对沙门氏菌血清和小肠结肠炎耶尔森氏菌都具有敏感性,所以通常不受小菌素PDI影响。嵌合ompF和定点诱变的表达显示大肠杆菌OmpF第一个细胞外循环区域K47G48N49是一个假定的小菌素PDI接合位点。

OmpR是OmpF转录调控子,因此与该功能相关的菌株很可能缺失敏感性,而敲除AtpA、AtpF、AtpE、AtpH就会导致小菌素PDI敏感性和ATP合酶功能缺失。在ATP合酶抑制剂存在的条件下,与具有敏感性的菌株共培养,就会导致该菌株失去敏感性,从而证明ATP合酶对于小菌素PDI活性是必须的。

在敲除了dsbA和dsbB的大肠杆菌中反式表达ompF,对修复敏感性表型没有作用,表明这些蛋白质可能涉及OmpF和小菌素PDI二硫键的形成。

陈晓雪摘译

http://aem.asm.org/content/81/20/6953.full.pdf+html

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