PNAS:中国科技大学单革教授发布p53研究新成果

来自中国科技大学的研究人员报告称，他们采用一种新的筛选方法成功筛选出了针对具有单氨基酸突变p53蛋白的RNA适配体。这一重要的成果发布在7月27日的(PNAS)上。

领导这一研究的是中国科技大学的单革(Ge Shan)教授，其主要研究领域包括基因表达调控、非编码rna的功能及作用机理、模式动物中神经系统的发育与分化。

p53为肿瘤抑制蛋白，属于最早发现的肿瘤抑制基因(或抑癌基因)之一。p53蛋白能调节细胞周期和避免细胞癌变发生。因此，p53蛋白被称为基因组守护者。p53在保持基因组的稳定性，避免突变发生。在遏制肿瘤细胞生长、DNA修复、以及细胞凋亡等方面扮演着十分重要的角色。通常50%以上的癌症病人中p53基因发生了突变，p53R175是p53的一种热点突变。

1990年Tuerk和Ellingto报道了一种在体外应用随机单链寡核苷酸文库筛选、扩增特定配体的技术，此技术可以得到能与非核酸靶分子具有高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸序列，此技术称为指数富集配基的系统进化技术(SELEX),筛选出的寡核苷酸序列称为核酸适配子(aptamer)。由于核酸适配子与抗体类似，与靶物质结合的特异性和亲和力甚至可以优于抗体，加上其靶分子广、稳定性强、易改造修饰等特点，可在基础研究、临床诊断、药物研发等方面得以广泛应用，而受到关注。

在这篇文章中研究人员报告称，他们采用一种新的利用SELEX的对比筛查策略，分离出了特异性针对p53R175H的一种RNA适配体。体内外实验证实，这一RNA适配体(p53R175H-APT)对于p53R175H的亲和力明显强于对野生型p53的亲和力。p53R175H-APT可以降低包含p53R175H的人类肺癌细胞的生长速度，减弱其迁移能力，触发细胞发生凋亡。进一步的分析表明，p53R175H-APT可以在部分程度上挽救或是纠正p53R175H，使其功能更接近于野生型p53。最后，通过将p53R175H-APT原位注入到小鼠肿瘤异种移植物中，研究人员证实了这一RNA适配体对于p53R175H突变的效应。

原文标题：The isolation of an RNA aptamer targeting to p53 protein with single amino acid mutation

原文摘要：p53, known as a tumor suppressor, is a DNA binding protein that regulates cell cycle, activates DNA repair proteins, and triggers apoptosis in multicellular animals. More than 50% of human cancers contain a mutation or deletion of the p53 gene, and p53R175 is one of the hot spots of p53 mutation. Nucleic acid aptamers are short single-stranded oligonucleotides that are able to bind various targets, and they are typically isolated from an experimental procedure called systematic evolution of ligand exponential enrichment (SELEX). Using a previously unidentified strategy of contrast screening with SELEX, we have isolated an RNA aptamer targeting p53R175H. This RNA aptamer (p53R175H-APT) has a significantly stronger affinity to p53R175H than to the wild-type p53 in both in vitro and in vivo assays. p53R175H-APT decreased the growth rate, weakened the migration capability, and triggered apoptosis in human lung cancer cells harboring p53R175H. Further analysis actually indicated that p53R175H-APT might partially rescue or correct the p53R175H to function more like the wild-type p53. In situ injections of p53R175H-APT to the tumor xenografts confirmed the effects of this RNA aptamer on p53R175H mutation in mice.

作者：秩名