我院主持的国家国际合作项目“水稻条纹病毒侵染相关的水稻microRNA分离鉴定及应用”通过验收

水稻条纹病毒（Rice strip virus，RSV）是一种对水稻生产安全极具威胁的RNA病毒，曾在我国浙江、江苏、福建、云南等大面积流行，至今已蔓延至我国20个省市自治区的水稻产区。据统计，仅江苏省2004～2005 年间每年发病面积达170万公顷，重病田超过100万公顷，部分田块绝收，给水稻生产造成了惨重损失。microRNA（miRNA）是一类基于序列互补、负调控基因表达的内源小RNA分子。在科技部国际合作项目的资助下，本项目开展了RSV 侵染后水稻miRNA表达特征、水稻内源miRNA前体的可利用性、病毒特异性人工miRNA设计、人工miRNA基因的水稻遗传转化及抗病毒鉴定等研究工作。通过与英国洛桑试验站的合作，重点解决了有关sRNA克隆的技术难点，建立了与病毒侵染有关的miRNA技术体系，获得了大量有关病毒sRNA以及水稻内源miRNA表达的数据资源；明确了水稻条纹病毒来源的sRNA及其侵染后水稻miRNA的表达特征；发现了10多条新miRNA，分析了其靶基因及其所指导的切割位点。扩增并克隆了6个水稻天然miRNA的前体骨架，其中有3个已成功用于携带外源人工miRNA在水稻体内高效表达。设计了15条专一性针对RSV基因组的人工miRNA。利用这些人工miRNA基因，采用农杆菌介导的水稻遗传转化方法，经过分子鉴定和人工接种病毒鉴定研制了一批可稳定遗传的高抗RSV的转基因水稻新种质。

通过本项目的实施，发表SCI论文10篇，授权发明专利2项，申请1项。培养博士后2名、博士生3名、硕士生5名。

承担该国际合作项目，还进行以中方为主导的国际合作模式的有效探索，提升了我方在水稻病毒前沿研究领域的创新能力和国际竞争力。(病生所)