银缕梅 MADS-box 家族基因 PsuAP1 的克隆、生物信息学表达分析

本研究以珍稀濒危植物银缕梅为材料，利用同源克隆与 RACE 技术克隆得到一个 AP1-like 基因的cDNA 全长序列，命名为 PsuAP1。利用生物信息学方法对它所编码的氨基酸序列进行分析，结果表明，该基因序列全长 916 bp，开放阅读框长度为 747 bp，编码 248 个氨基酸，分子质量约 28.62 kD，理论等电点为9.84，是一种不稳定亲水蛋白。保守结构域分析表明该基因属于 MADS-box 家族基因；序列比对分析显示其氨基酸序列与连香树相似性最高，达 78.57%，进化树聚类分析也表明 PsuAP1 与连香树的氨基酸亲缘关系最近。亚细胞定位分析显示该蛋白定位于细胞核。二级结构中同时含有 α- 螺旋、延伸链和无规则卷曲结构，分别占比 47.18%、11.29%、41.53%。荧光实时定量 PCR 分析表明，PsuAP1 基因在花及果实中均有大量表达，推测其与花的发育以及果实的成熟相关。PsuAP1 基因的克隆以及表达分析使银缕梅开花调控机理的研究取得了新的突破，为该基因功能的进一步深入研究提供了实验材料以及理论基础。