流苏树根尖染色体制片技术优化及核型分析

本研究以流苏树(Chionanthus retusus)种子的初生根尖为材料，从取材时间、预处理试剂、预处理时间以及解离方法等条件对常规染色体压片技术进行改进与优化，以获得流苏树核型分析的清晰制片。结果表明，取材时间为 9:30~10:00 am时根尖中期细胞最多，约占 20%~25%；对二氯苯、0.002 mol/L 8- 羟基喹啉溶液、对二氯苯与 8- 羟基喹啉混合液以及冰水混合物四种不同预处理试剂均可获得形态清晰、分散良好的适用于核型分析的清晰制片，其中对二氯苯的最适预处理时间为 1 h，0.002 mol/L 8- 羟基喹啉和对二氯苯与8- 羟基喹啉混合液的最适预处理时间均为 6 h，冰水混合物的最适预处理时间为 6 h；解离的最适方法为：先用 0.075 mol/L KCl溶液前低渗 20 min，接着蒸馏水冲洗后放入 1 mol/L HCl溶液中 60℃处理 10 min。流苏树染色体核型公式为 2n=2x=46=40m+6sm，流苏树染色体为 2B型，核型不对称系数 As·K%为 57.18%，染色体相对长度组成为 2n=7L+14M2+19M1+6S。