澳洲棉细菌人工染色体文库构建

携带大片段基因组 DNA 的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)文库是进行基因组结构与功能等相关研究的重要基因组资源。澳洲棉是二倍体野生棉,具有抗或耐棉蚜、抗黄萎病、抗干旱、增加衣分率、提高纤维成熟度的潜力,种子无腺体或植株有腺体等许多优良性状。本研究是在现有的野生棉二倍体和四倍体棉 BAC 文库基础上,以二倍体野生棉种澳洲棉为实验材料,提取澳洲棉幼嫩叶的 DNA,经过 Hind Ⅲ酶切片段化,克隆到 pSMART BAC (Hind Ⅲ)载体,构建了澳洲棉的基因组细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)文库。该文库总共包含 16 128 个克隆(42 个 384 孔板),平均插入的片段为 120 kb,基因组覆盖率约 1.06 倍。澳洲棉 BAC 文库的构建将为棉属野生种质资源的保存与利用积累重要基因组资源。

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