洋葱 orf393 基因线粒体定位表达载体构建及功能初探

通过转基因拟南芥表型分析对洋葱线粒体差异表达基因 orf393 的功能进行了初步研究。通过In-Fusion Cloning 的方法，将基因 orf393 与编码线粒体定位的靶向肽序列 Rf1b5' 融合，构建了 orf393 基因的线粒体定位表达载体 pROK2-Rf1b5'-orf393，通过花序浸染法成功转化至野生型拟南芥，获得了雄性育性降低的拟南芥转基因植株，转基因植株的雄蕊花丝变短，柱头表面光滑几乎没有花粉附着，花药颜色暗淡无法正常开裂，种荚短小皱缩、结实率低。亚历山大染色实验结果显示，转基因植株的花药中花粉量少，仅含有极少量的活性花粉。初步证明线粒体基因 orf393 与细胞质雄性不育有一定关系，为明确 orf393 参与洋葱细胞质雄性不育的分子机制提供了参考。