HbTCTP及其截短体酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

为进一步鉴定橡胶树翻译控制肿瘤蛋白(HbTCTP)与橡胶延伸因子 1 (HbREF1)互作的分子区域，构建 HbTCTP及其截短体的诱饵载体。本研究利用 RT-PCR技术从橡胶树胶乳中扩增出包含 HbTCTP不同结构域的片段，克隆到 pGBKT7表达载体，通过酶切、菌落 PCR和测序鉴定后，转化酵母 Y2HGold感受态细胞，检测诱饵蛋白是否具有自激活作用和毒性。结果显示，成功构建 6个包含 HbTCTP不同结构域的诱饵载体，且诱饵载体对酵母宿主细胞无毒性和无自主激活报告基因的功能。本研究结果为进一步筛选 HbTCTP与 HbREF1互作的分子区域及阐明HbTCTP 的功能提供科学依据。