转基因马铃薯外源基因插入位点分析及检测方法的建立

09-4为本实验室构建的抗马铃薯 PRLV的 RNAi基因和特异切割马铃薯 PSTVd的核酶基因无标记双价表达载体 pCAMBIA3301-DR-IS导入马铃薯中获得的转基因无性系。本研究通过染色体步移获取转基因无性系 09-4的插入位点左边界旁侧序列，对获得的左边界序列进行分析，扩增获得片段大小为 382 bp，包括转化载体序列 119 bp及转基因马铃薯的旁侧序列 263 bp；依据转化马铃薯的 RNAi基因和左旁侧序列分别设计引物，扩增出大小为 300 bp的片段，建立了 09-4转基因无性系特异性标识和特异 PCR检测方法，为转基因马铃薯的检测和身份识别提供技术基础。