黄灯笼辣椒CcCAD1基因的克隆与植物表达载体的构建

肉桂醇脱氢酶(cinnamyl alcohol dehydrogenase, CAD)在木质素生物合成中有着重要作用,为了探讨辣椒中 CAD基因在木质素合成中的作用,本研究利用 RT-PCR方法从黄灯笼辣椒幼嫩叶片中克隆得到CAD1 基因全长 cDNA,命名为CcCAD1。序列分析表明,CcCAD1 cDNA序列全长 1 074 bp,编码 357个氨基酸。同源比对显示其与番茄 CAD1蛋白的一致性高达 96.09%。荧光定量 PCR检测结果显示,CcCAD1 基因在辣椒根、茎、叶、胎座和果肉中的表达量差异显著,其相对表达量为叶跃果肉跃茎跃根跃胎座。利用BamH玉和Sac玉双酶切连接成功构建 pBI121-CcCAD1 植物表达载体,为CcCAD1 基因转化以及后续的功能分析提供依据。

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