油茶(Camellia oleifera)果生刺盘孢菌(Colletotrichum fructicola) Hog1 基因 功能和致病性分析

为了探讨 Hog1 基因在油茶果生刺盘孢菌(Colletotrichum fructicola)致病过程中的作用。本研究以酿酒酵母中的 Hog1 基因为依托，进行 BlAsTP 比对分析油茶果生刺盘孢菌的全基因组数据，以获取与其高度同源的 Hog1 蛋白序列，通过对 ATMT 体系进行改进和调整，建立了炭疽病菌基因敲除体系。采用形态观察、显微鉴定、生物学表型分析方法，基于科赫法则(Koch postulates)，检测病原菌的致病力大小。结果表明，本试验成功敲除了 C. fructicola 野生型菌株 CFLH16 Hog1 基因，发现突变体菌株 △C.f Hog1 与 CFLH16 相比，其产孢量显著下降，且无法形成附着胞，基本丧失致病能力；△C.f Hog1 对盐胁迫(NaCl)与 CFLH16 相比其敏感性显著降低，对细胞壁胁迫(SDS)和过氧化物胁迫(H2O2)与 CFLH16 相比其敏感性不明显。研究发现 C.f Hog1基因编码的蛋白质是果生刺盘孢菌生长发育过程中一个重要蛋白，参与调控病菌的附着胞形成、致病过程以及对外界胁迫的应答。本试验针对油茶炭疽病害的功能基因进行探索，为油茶病害分子机制研究提供了参考依据，为进一步实现油茶病害有效调控的目标打下了基础。