烟草 NBS-LRR 类抗病基因同源序列的克隆及分析

通过同源克隆法获得烟草抗病基因同源序列(RGAs)，为烟草抗病基因的筛选和相关研究提供帮助。基于抗病基因的 NBS-LRR 保守结构域，筛选并合成了 3 对简并引物，扩增烟草中的 NBS-LRR 类抗病基因。获得了 4 条与抗病基因具有高度同源性的 NBS-LRR 类烟草抗病基因同源序列(TRGA, 登录号: MK634316, MK634317, MK634318, MK634319)，目的片段大小均在 500 bp 左右；BLAST X 分析表明，获得的 4 个烟草RGAs 与已知 RGAs 具有高度相似性，氨基酸相似性为 97%~100%；聚类分析将其分成 2 大类，包括 TIRNBS-LRR 和 non-TIR-NBS-LRR 两类抗病基因，其编码氨基酸序列含有 NBS 保守区的典型特征基序。通过简并引物进行同源扩增是分离烟草 RGAs 的有效方法，可为进一步抗病基因筛选及抗病分子育种奠定基础。