铁皮石斛 DoSAMDC-like 基因的克隆及原核表达

本研究从药用植物铁皮石斛中克隆得到 S- 腺苷甲硫氨酸脱羧酶(S-adenosyl-L-methionine decarboxylase)基因(DoSAMDC-like)并进行序列分析和原核表达。SA MDC 基因家族具有多个成员，本研究采用同源克隆的方法对铁皮石斛中尚未报道的新成员 DoSAMDC-like 基因进行克隆，并与拟南芥 SAMDC 基因家族成员和铁皮石斛基因组注释序列进行比对分析、蛋白质特征及原核表达等分析。基因序列分析表明，DoSAMDC-like 基因编码区全长 1 104 bp，推测编码 368 个氨基酸，氨基酸序列具有 SAM_decarbox 超家族共同的保守结构域。多序列比对及进化树结果表明，克隆获得的 DoSAMDC-like 基因序列对应于基因组测序注释的 XM_020825443.2 序列，一致性为 99.55%，与铁皮石斛 SA MDC1 基因一致性为 80.16%。异源表达结果表明，DoSAMDC-like 基因受 IPTG 诱导，蛋白分子量约为 47 kD。DoSAMDC-like 基因的克隆和原核表达，可为参与铁皮石斛多胺代谢、生物碱合成相关基因的蛋白质生化活性等研究提供了帮助。