苹果茎尖超低温脱毒体系的建立

病毒病是苹果栽培亟待解决的问题，不仅严重损坏苹果品质，还给树体带来毁灭性灾害。超低温脱毒技术的诞生和发展对果树脱毒苗的培育产生了重要影响。本试验研究出新型茎尖超低温脱毒技术体系并成功脱除苹果病毒 ACLSV 和 ApMV。试验选取‘烟富 3 号’、‘烟富 10 号’、‘M9’、 ‘M9T337’四种苹果及砧木材料，提取总 RNA 进行 RT-PCR 病毒检测，发现‘烟富 3 号’携带 ACLSV 和 ApMV，苹果砧木‘M9’和‘M9T337’携带 ACLSV。对携带病毒材料进行初代、继代扩繁培养，然后取 2 mm 茎尖进行超低温处理，并用多重 RT-PCR 检测再生植株，获取脱毒苗后进行生根培养与炼苗移栽。结果表明，最佳玻璃化超低温处理为：预培养采用 0.5 mol/L 蔗糖浓度处理 2 d，25℃下装载 60 min，0℃下 PVS2 溶液处理 90 min，液氮冷冻 1 h，
40℃水浴 2 min 解冻，苹果茎尖的存活率为 78.33%，脱毒率可达 95.74%。玻璃化超低温处理是产生脱毒效果
的直接原因，运用超低温处理可以有效脱除苹果病毒 ACLSV 和 ApMV。