水芹 HSP90 基因的原核表达及条件优化

植物热激蛋白 90 (HSP90)在响应高温胁迫中起到重要作用。本研究从水芹中克隆到 HSP90 基因(基因登录号: MF961800)，将其连接到原核表达载体 pET30a 上，构建重组质粒 pET30a-OjHSP90。对大肠杆菌菌株 BL21 表达重组蛋白的起始菌液浓度、IPTG 浓度、诱导温度和诱导时间进行了优化。结果显示，OjHSP90 基因在大肠杆菌中可实现诱导表达，目的蛋白分子质量约为 80 kD，与预期结果相符。当重组菌的起始 OD600 值达到 0.8 时表达量最高，pET30a-OjHSP90 的最佳 IPTG 诱导浓度为 0.2 mmol/L，最佳诱导温度为 37℃，最适诱导时间为 4 h。本研究通过诱导条件的优化可以使目的蛋白的表达量显著增加，以期为研究OjHSP90 的耐热功能提供理论依据。