橡胶树 HbSnRK2.6 家族基因的克隆、原核表达及纯化

低温是重要的环境胁迫因子，严重影响中国橡胶树的分布及胶乳的产量。在拟南芥中，低温能够激活蛋白激酶 SnRK2.6，并提高植物耐寒性能，但橡胶树中的 SnRK2.6 至今未被克隆。本研究以橡胶树 7-33-97为材料，从 cDNA 中扩增出两个 SnRK2.6 基因(HbSnRK2.6A 和 HbSnRK2.6B)。氨基酸序列比对分析表明，HbSnRK2.6A 和 HbSnRK2.6B 与其他物种中的SnRK2.6 存在较高的同源性。将 HbSnRK2.6A 及 HbSnRK2.6B构建到原核表达载体上，在 E. coli (DE3)中诱导并纯化 HbSnRK2.6 重组蛋白，结果表明 HbSnRK2.6A 和 HbSnRK2.6B的最佳诱导条件是：16 ℃诱导 16 h，IPTG 浓度为 0.6 mmol/L。最终我们成功在大肠杆菌中表达并得到了大量橡胶树中的蛋白激酶 SnRK2.6。