芒果 MinSPS1 基因的克隆及表达载体的构建

蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase, SPS)既是调控蔗糖合成的关键酶又是限速酶，为了研究其在芒果果实中蔗糖合成的作用机理，本研究从芒果果肉中克隆得到一个与蔗糖合成相关的基因，将其命名为 MinSPS1，其 cDNA 全长序列为 3 344 bp，开放阅读框为 3 168 bp，编码 1 055 个氨基酸，蛋白质分子量为 118.13 kD，等电点为 6.08，对 MinSPS1 基因编码的蛋白进行系统发育分析，发现其与柑橘具有较近的亲缘关系。采用 qRT-PCR 对该基因在后熟处理的贵妃芒果肉中的表达量进行分析，结果显示在完熟期贵妃芒果肉中表达量较高，而在青熟期表达量较低。本研究为深入了解芒果蔗糖合成的分子机理，进一步构建了pCAMBIA1301-MiSPS1 过表达载体，为 MinSPS1 的功能鉴定提供理论依据。