紫花苜蓿MsNAP启动子克隆及转基因分析

启动子位于基因上游，起着调控基因转录的作用，是研究基因表达特征和功能的重要元件。为了研究 MsNAP启动子活性，探究 MsNAP基因功能，进而研究高产优质的紫花苜蓿，造福畜牧业，本试验利用染色体步移法，成功获得了紫花苜蓿 MsNAP基因翻译起始位点上游 1 390 bp 序列，通过生物信息学分析，发现该区域存在一个完整的启动子，含有多种顺式作用元件。利用 DNA重组技术，成功构建了 MsNAP启动子表达载体，通过农杆菌介导技术成功转入到烟草中。选取衰老与未衰老的烟草叶片，进行葡萄糖苷酸酶(glucuronidase, GUS)染色分析，结果显示，在衰老叶片中 GUS 活性远远高于未衰老叶片，表明 MsNAP启动子在衰老的叶片中具有较高的转录调控活性，从而为深入研究 MsNAP启动子活性和分析 MsNAP基因的功能提供了基础。