农杆菌介导酸枣叶片遗传转化SPDS 基因体系的建立

为研究根癌农杆菌介导的 SPDS 基因遗传转化酸枣叶片体系建立的条件，本研究以酸枣叶片为受体，采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens, LBA4404)介导法，将 SPDS 基因导入酸枣基因组，并对其遗传转化体系进行优化，对筛选获得的转基因酸枣植株进行检测。结果表明，根癌农杆菌介导的 SPDS 基因遗传转化的最佳条件为：将预培养 3 d 的酸枣叶片，用 LBA4404菌株菌液(OD600=0.6)浸染 15 min，共培养 3 d，然后转入含 Kan 20 mg/L和 Cef 200 mg/L的筛选分化培养基上诱导分化，待抗性芽长到 2~3 cm 后，转入含 Kan 40 mg/L和 Cef 100 mg/L的筛选生根培养基上进行筛选，在以上最佳遗传转化条件下，经过 3次筛选得 到19个抗性植株，经PCR检测，有9株呈阳性，即SPDS基因已被整合到酸枣基因组中，并可以正常转录。本 研究成功建立了根癌农杆菌介导的酸枣叶片高效遗传转化体系，为枣树基因工程育种和种质创新提供了帮助。