CRISPRCas9介导靶向敲除拟南芥MS2基因突变体的鉴定

CRISPR/Cas9 (Clustered regulatory interspaced short palindromic repeat/Cas9)基因编辑技术在生命科学领域掀起了一场重大的技术革命，它比锌指核酸酶(ZFNs)和转录激活因子效应物核酸酶(TALENs)技术更易于操作，而且更高效。CRISPR/Cas9 系统已经被广泛应用到植物科学研究领域中。本实验选取拟南芥 MS2为目的基因，构建植物基因编辑系统的表达载体，并通过农杆菌介导的方法转化拟南芥，从而利用 CRISPR/Cas9 系统靶向敲除拟南芥 MS2 基因。对转基因后代的 MS2 测序结果分析表明，在获得的 12 个阳性转化植株中，发现了 5 个阳性植株存在基因序列上的新碱基插入，由此形成 CRISPR/Cas9 介导的拟南芥 MS2 突变体。这一工作为后续分析其他物种中 MS2 同源基因的功能研究提供参考依据。