最牛的转基因大豆什么样子？

孟山都公司2018年3月8日宣布，公司的Intacta 2 Xtend转基因大豆正式获得巴西批准。之前公司曾预测该批准有望在4月份获得。Intacta 2 Xtend转基因大豆具有耐麦草畏和草甘膦的性状，还可以抵抗部分鳞翅目害虫的侵袭。预计该款大豆将于2020年开始在巴西销售。公司介绍，Intacta 2 Xtend是孟山都传统草甘膦大豆Intacta RR2 Pro的接班产品，Intacta RR2 Pro同时具有抗虫和耐草甘膦特性，但是没有耐麦草畏特性。巴西作为全球第二大大豆生产国和最大的油料种子出口国，是孟山都非常重要的市场。孟山都目前已经开始在巴西向农民推介Intacta 2 Xtend大豆，这目前应该是世界上最牛的转基因大豆了。

你知道转基因大豆是怎么来的吗？今天来点专业的科普。

介绍一种采用农杆菌介导的子叶节转化法。农杆菌菌株为EHAl05，双元载体质粒以pCAMBIA3300为骨架，构建由强组成型启动子E12、CaMV35S调控的植物表达载体pCBA1，目的基因为野生大豆基因Al，筛选标记基凶为除草剂抗性Bar基因。

挑取含有目的基因的农杆菌单菌落或冻存管农杆菌，按1：100的比例接种于含有抗生素的YEP液体培养基上，200 r·min-1振荡培养过夜，进行一次活化。二次活化按1：10的比例振荡培养6-8 h，即可用于侵染。侵染前，将活化好的农杆菌菌液分装到50 mL的离心管中，每管约40 mL，4 000 r·min-1，离心5 min，菌体沉淀用等体积的菌体重悬培养基REM重悬菌苗的获得及外植体的制备技术流程：挑选粒大、饱满、无病斑的成熟种子，采用氯气消毒法灭菌。在超净工作台内将种子吹至无明显氯气味道后，接种在萌发培养基GM上，温度为(24±1)℃，每天光照16 h。种子萌发5 d后，幼苗可用作下一步外植体制备。取5 d苗龄的无菌苗，去掉种皮，保留子叶及下方的下胚轴，用解剖刀将2片子叶沿下胚轴的方向平行切开，去除所有的芽，分别在子叶节有效分化部位划5-7刀，将外植体转入PCM培养基中培养1 d。

农杆菌的侵染及共培养。将制备好的子叶节外植体，放入装有工程重悬液的三角瓶中，大约每30ml菌液40个子叶外植体，负压5min，侵染30min。侵染结束后，用无菌滤纸吸干子叶节外植体表面的菌液，然后将其近轴面向下放入含有30mlCCM的90×15mm的培养基中（CCM上附有一层无菌滤纸），24℃黑暗培养3d。

不定芽诱导：共培养3 d后，用液体不定芽诱导培养基SIM清洗除去子叶节外植体表面的农杆菌。用无菌滤纸吸干子叶节外植体表面多余水分后即可转入SIM培养基中进行不定芽诱导培养，14 d后，取出外植体，将下胚轴与培养基接触部分切出新的伤口，转人含有相应浓度筛选剂草甘膦的芽诱导培养基中。

不定芽伸长：不定芽诱导28 d后，转入不定芽伸长培养基中，每14 d继代1次，直到不定芽伸长到3-5 cm。

诱导及驯化、移栽：当不定芽伸长到3-5cm之间时。将其从基部切下，在1 mg·ml-1 IBA中蘸1-2 min后，转入RM中进行生根培养。 当根长至约2-3 cm时，移栽到混合土(蛭石：珍珠岩：上层土壤=1:1:1），散射光下覆膜保湿培养。25℃，约3-5 d后转入正常光下培养。

提取抗性植株的DNA，进行Bar基因的PCR分析，如果能扩增出条带即为阳性苗。