樟树 WRKY 转录因子的克隆与表达分析

WRKY 转录因子超家族在植物生物和非生物胁迫响应、生长发育、代谢过程中起着重要的调控作用。本研究基于樟树叶高通量转录组数据设计特异引物，以芳樟醇型樟树叶片为材料，克隆获得 6 个CcWRKY 转录因子，分别命名为 CcWRKY1，CcWRKY2，CcWRKY3，CcWRKY4，CcWRKY5，CcWRKY6；序列多重比对显示，CcWRKY 蛋白均含有一个保守 WRKYGQK 氨基酸残基；系统进化分析表明，除CcWRKY2属于第域类，其余 5 个基因均属第芋类WRKY 转录因子亚家族；杨树原生质体瞬时表达结果显示，6 个CcWRKY 蛋白均定位于细胞核；实时定量 PCR 检测结果揭示：6 个基因在不同组织的表达模式较为相似，均是嫩叶表达量高于花蕾，嫩茎和幼果；在不同化学型中，3 个基因CcWRKY1，CcWRKY2，CcWRKY4 在芳樟醇型樟叶中优势表达，CcWRKY3 在樟脑型叶中表达量相对较高；而 CcWRKY5，CcWRKY6 的表达均相对较低。推测 CcWRKY1，CcWRKY2，CcWRKY4 可能参与单萜类化合物芳樟醇的合成调控。