番木瓜成熟种子的体细胞胚简易诱导和植株再生

目前中国番木瓜产业受到环斑花叶病等病害的严重威胁，利用生物技术手段创制新种质、培育高产优质的抗病新品种成为番木瓜产业发展的亟需。本研究以‘一尺瓜’品种的 140~150 d 龄果实成熟种子为外植体，研究了其体细胞胚诱导和植株再生技术。结果发现了一种非常简单有效的外植体杀菌消毒方法，即用自来水将果实外表清洗干净，然后用 70%酒精对果实进行表面消毒即可。该品种成熟种子理想的胚性愈伤组织诱导培养基组成为：1/2 MS (Murashige and Skoog, 1962)+2 mg/L 2,4-D (2,4 dichlorophenoxyacetic acid)+400 mg/L 谷氨酰胺+60 g/L 蔗糖+7 g/L 琼脂粉，胚性愈伤组织诱导率可达 45%。将胚性愈伤组织置于含 1 mg/L2,4-D 的增殖培养基继代培养 2 个周期后，可获得大量均质的表面含有白色体细胞胚的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织团在不含任何激素的培养基上可完成体细胞胚的诱导、成熟、萌发和生根过程。挑取具有芽和根的体细胞胚转移到再生培养基培养 30 d 后可获得具有正常叶片和根系的完整植株，其发育为正常植株的百分率为 52.5%。本研究为番木瓜生物技术育种建立一套简单、高效的体细胞胚再生技术体系提供技术支撑。