一种快速高效的油茶叶片DNA提取方法

油茶叶片含有较多的多糖和多酚等次生代谢产物是提取DNA的重要障碍。本研究以油茶叶片为材料研究高质量的DNA提取方法。建立了一种改良的CTAB法，运用2×CTAB缓冲液来裂解细胞，在裂解细胞后的溶液中加入终浓度为2 mol/L LiCl，用氯仿异戊醇抽提溶液，用等体积的异丙醇沉淀DNA，用预热的70%乙醇洗涤DNA沉淀。运用紫外分析和琼脂糖凝胶电泳分析测定了DNA的产率和质量，并与经典SDS法、经典CTAB法、高盐低pH法进行了对比。结果表明，改良的CTAB法提取的DNA产率比经典SDS的少，与经典CTAB法和高盐低pH法的相似，达到39.0 μg/g,且纯度高，无RNA的污染。改良的CTAB法提取的叶片DNA可用于油茶后续的PCR分析研究。