花生NADH脱氢酶1亚基10B-like基因克隆表达分析及载体构建
发表日期:2018-04-17 09:30PM 阅览次数:
NADH脱氢酶是线粒体氧化呼吸链上重要的复合物,对线粒体功能有至关重要的作用。本研究以花生品种“日花1号”为材料,利用RACE方法成功得到NADH脱氢酶1亚基10B-like基因(ND1-10B-like)的cDNA和DNA全长。该基因cDNA序列的全长包括186bp的开放阅读框,编码61个氨基酸。DNA全长为300bp,含有两个外显子和一个内含子。一级结构分析表明,该蛋白质分子量为7127.02Da,等电点为10.29。本研究使用荧光定量技术(qRT-PCR)分析了该基因在花生品种日花1号植株中的组织表达和青枯菌胁迫条件下的表达变化规律,还构建了该基因的过表达载体pCAMBIA2300-OE-ND1和反义表达载体pCAMBIA2300-IN-ND1,并为进一步研究花生中该基因的功能及其在花生抗青枯病中的作用奠定基础。