酵母双杂诱饵表达载体pGBKT7-ufgt的构建与表达

构建葡萄赤霞珠(Vitis vinifera L. cv Cabernet Sauvignon)花色苷合成前体酶——类黄酮葡萄糖基转移酶(UDPG-flavonoid-3-O-glycosyltranferase, Ufgt)诱饵表达载体。通过RT-PCR扩增获得葡萄ufgt基因CDS序列，与pGBKT7酵母诱饵载体连接；经测序和双酶切鉴定后，转化酵母菌株AH109，分析Ufgt蛋白在酵母菌株中的表达情况。成功扩增出ufgt基因CDS全长，并成功构建了pGBKT7-ufgt，重组载体pGBKT7-ufgt成功的转化到AH109酵母菌株中，且无毒和自激活性，能够正确稳定的表达。pGBKT7-ufgt酵母诱饵蛋白表达载体被成功构建，为后续Ufgt蛋白互作筛选奠定基础。