桑花叶萎缩类病毒滚环扩增检测技术体系的建立

为建立一种快速、灵敏、简单的检测类病毒的方法，以桑花叶萎缩类病毒为研究对象，根据其基因组设计了1条特异性连接环化的寡核苷酸链探针和2条PCR扩增检测引物，对收集到的6份桑花叶型萎缩类病毒样品进行了滚环扩增。结果所有样品的RCA扩增产物的核酸电泳，条带呈阶梯状分布，但大部分聚集于上样孔附近，与理论分析相符，表明该方法适用于桑花叶萎缩类病毒的快速检测。进一步利用人工合成的模拟DNA分子测试该检测方法的灵敏度，研究显示，利用RCA技术可以成功检测到103拷贝的模式DNA分子。