倍体野生种马铃薯Solanum pinnatisectmum原生质体分离与纯化的研究

为获得较好的原生质体分离和原生质体纯度，试验以野生种马铃薯(S.pinnatisectmum)试管苗叶片为材料，进行了原生质体分离和纯化的研究。结果表明：培养3周左右的试管苗叶片均在含有0.4%纤维素酶＋0.7%果胶酶＋0.1%离析酶，渗透压为0.3 mol/L的酶解液中解离效果最好，原生质体产量为1.93×106／gFW；在25±1℃酶解温度条件下静置14h，可促进叶片原生质体的大量释放。而且，外源激素组合0.5mg/LIAA+2.5mg/LZeatin有利于S.pinnatisectmum叶片原生质体的分裂，原生质体一次分裂频率达到6.32%。研究获得了稳定的原生质体分离体系以及较好的原生质体培养条件，为马铃薯野生种Solanum pinnatisectmum的体细胞融合提供了依据。