芦笋ISSR反应体系的建立及优化

通过正交试验建立芦笋ISSR优化反应体系，并对其反应程序进行优化。实验结果表明，优化的扩增体系：25 µL的反应体系中含150 ng的模板DNA、0.3 µmol/L 引物、15 µL 2× Mastermix；优化的反应程序：94℃预变性5 min； 94℃变性45 s，设定温度退火60 s，72℃延伸 45 s，循环30次；然后 72℃延伸10 min，4℃保存；筛选到了21条引物并确定其最优退火温度。实验结果为芦笋资源遗传多样性评价的研究奠定基础。