中国新研发一种免疫层析方法可快速检测大肠杆菌
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室和中国检验检疫科学研究院食品安全研究所的研究人员新研发一个快速检测大肠杆菌的免疫层析方法,这一方法的建立对于食品中有害物质的现场快速检测具有重要意义。相关文章发表于《分析化学》杂志上。
大肠杆菌O157:H7是肠出血性大肠杆菌的一个主要血清型,最低10个活菌就可能感染致病。传统分离鉴定检测大肠杆菌O157:H7的方法基于预增菌和后续的生化及血清型鉴定,需要耗费大量的时间和人力。
本文以抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体偶联磁珠制得免疫磁珠;以胶体金标记的抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体作为标记抗体,抗大肠杆菌O157:H7多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别作为检测线和质控线制备胶体金免疫层析试纸条。将免疫磁分离和胶体金免疫层析法相结合应用于大肠杆菌O157:H7的现场快速检测中。
结果表明:1mL浓度为7.6×103 CFU/mL的大肠杆菌O157:H7菌液经过免疫磁珠分离富集后用胶体金免疫层析法检测可得到阳性结果。对于10 CFU/g大肠杆菌O157:H7污染的食品样本,经过6 h预增菌,免疫磁珠分离和胶体金试纸条检测72 min即可检出。本方法的建立对于食品中有害物质的现场快速检测具有重要意义。
在此研究的基础上,我团队将进一步提高免疫层析方法的灵敏度,缩短检测时间,并研究拓展此方法对于多种致病菌的检测的可能性,扩大其应用范围。
本文系国家自然科学基金(No.31271863),南昌大学食品科学与技术国家重点实验室自由探索课题(No.SKLF-ZZB-201307),南昌市科技项目(No.2012-CYH-DW-SP-001)资助。
论文链接:Establishment of a Method Combined Immunomagnetic Separation with Colloidal Gold Lateral Flow Assay and Its Application in Rapid Detection of Escherichia. coli O157:H7