世界首例基因敲除克隆犬“龙龙”于京诞生

2017年5月28日，中国首例体细胞克隆比格犬“龙龙”在北京希诺谷生物科技有限公司（以下简称希诺谷）实验室诞生。龙龙既是我国首例体细胞克隆犬，也是世界首例基因敲除克隆犬，标志着我国成为继韩国之后，第二个独立掌握犬体细胞克隆技术的国家，填补了我国体细胞克隆犬的技术空白。

龙龙 中国首例体细胞克隆犬 5月28日出生 体重200克

攻克难关 自建犬体细胞克隆技术平台
犬被认为是最难进行体细胞克隆的动物，主要原因如下：①犬的生殖生理与其它哺乳动物存在较大差异，发情鉴定较为困难；②犬排卵后卵母细胞尚未成熟，需要在输卵管成熟，造成卵母细胞的获取难度较大；③犬卵母细胞质量较差，对外界条件变化的刺激较为敏感，造成细胞或胚胎体外进行显微操作时容易死亡等。自2005年韩国科学家首次培育出体细胞克隆犬之后，犬的体细胞克隆技术一直掌握在韩国科学家手中，美国首例克隆犬也是在韩国科学家的指导下培育的。

自2016年3月始，希诺谷研发团队相继攻克了犬体细胞系建立、卵母细胞供体犬的发情鉴定、成熟卵母细胞的获取、体细胞核移植、胚胎融合激活及胚胎移植等技术难题，建立了具有自主知识产权的犬体细胞克隆技术平台。

希诺谷研发支持团队：陈大元（中）、赖良学研究员（右三）、施振声教授（右二）

高效克隆 复制优良基因
希诺谷建立的犬体细胞克隆技术平台主要用于培育工作犬、宠物犬以及基因编辑犬。缉毒犬、搜救犬、军犬及导盲犬等工作犬均有特殊应用价值，但是选育十分困难。利用体细胞克隆技术克隆优秀工作犬，成本更低、效率更高。目前，韩国已在其国内机场及救援队，大量装备克隆工作犬，这些犬均为具有优秀服役记录的缉毒犬或搜救犬的复制品。

此外，希诺谷将继续攻关犬体细胞克隆技术，优化各技术环节，提高犬克隆效率，推动宠物犬的商业克隆。目前，希诺谷已建立了专门的宠物基因存储库，并采用世界最先进的生物样本库保存系统，唯一ID认证。宠物主可自由存储宠物基因，为宠物未来可能进行干细胞治疗或克隆存储一份希望。

卵母细胞 犬的卵母细胞在输卵管成熟，且质量较差，增加了克隆难度

基因编辑 助推新药研发
龙龙，不仅是首例体细胞克隆犬，还是世界首例基因编辑动脉粥样硬化疾病模型犬“苹果”的体细胞克隆后代。体细胞克隆技术能一次性培育出一批遗传背景一致、年龄相近的实验犬，便于更有效地筛选出疗效显著的新药。

苹果 世界首例基因编辑动脉粥样硬化疾病模型犬

2016年12月29日，比格公犬“苹果”出生了。20天后，比格母犬“葫芦”也顺利出生了。经过5个多月的观察，这两只幼犬都表现出一些动脉粥样硬化的典型症状，如脂类代谢紊乱、高血脂等，这正是研究人员希望看到的结果。

研究人员利用最新基因编辑技术CRISPR/Cas9，成功敲除比格犬的载脂蛋白E（APOE）基因，培育出动脉粥样硬化疾病模型犬“苹果”和“葫芦”。这是继2015年我国取得犬基因打靶技术突破之后，首次将其应用于人类遗传疾病犬模型的培育，标志着我国基因编辑犬技术已走向成熟，并达到国际领先水平。

希诺谷团队：“技术”为国争光，“爱心“让爱延续

希诺谷在多名专家指导下，建立了一支由多名博士和硕士组成的精干高效技术团队，并配套建设有手续齐全的动物实验中心。公司结合自身研发基础和市场需求，正在建立各类工作犬、宠物犬及纯种名贵犬的基因信息保存库，为用户提供高效的犬种质保存和体细胞克隆犬服务，同时还将开发一批新的人类疾病模型犬，力争打造国内最大的体细胞克隆犬研发服务中心和国际领先的基因编辑犬技术服务企业。