从宏基因组文库检索四种新型嗜碱性酶

酶的发现在工业过程中在顽固性生物量的结构中具有重要作用。新酶的发现可通过将宏基因组学应用到微生物。本研究目标在于选择,检查和表征以前在宏基因组文库中检测到的八种新型糖苷水解酶,以在生物技术方面应用。

使用分子克隆和大肠杆菌基因表达研究,从小麦秸秆降解微生物基因组中选出8个糖基水解酶家族候选基因。其中四种酶具有pNP-β-D-吡喃半乳糖苷,pNP-β-D-吡喃木糖苷,pNP-α-1-阿拉伯吡喃糖苷或pNP-α-D-吡喃葡萄糖苷活性。这些蛋白质,表示为蛋白质1,2,5和6,是纯化的标签,其性质和活性进一步用分子和活性筛选与pNP标记的底物进行表征。蛋白质1和2与(1)β-半乳糖苷酶(74%)和(2)β-木糖苷酶(84%)显示出高度的同源性,而剩余的两个(5和6)蛋白质与二葡聚糖环化酶和水通道蛋白同源。

通过合理的筛选方法,实验鉴定出四种热嗜碱糖基水解酶,可能作为酶成分从木质纤维素中生产糖。

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