濒危植物香果树(Emmenopterys henryi) SRAP反应体系的建立与引物筛选

以珍稀濒危植物香果树(Emmenopterys henryi)基因组DNA为研究对象，对影响SRAP-PCR反应的因素如Mg2+浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶、引物浓度4因素进行优化。确定香果树SRAP反应体系为：20 μL PCR反应体系，50 ng模板DNA，1×Buffer，2.5 mmol/L Mg2+，1 U Taq聚合酶，0.3 mmol/L dNTPs，正向和反向引物各0.3 μmol/L；在香果树2份样品中进行引物初筛，利用已发表的SRAP引物，选取8条正向引物和8条反向引物，共计64对引物。从中筛选出10对重复性好，谱带清晰且稳定的引物。并将这些引物在香果树2个野生居群20份样品中进行遗传多样性分析，共得到72条扩增谱带，其中多态性谱带60条，多态性比率83.3%，平均每个引物组合产生6个多态性位点，供试材料间遗传变异相对丰富。