水稻类病变突变体ugp8的鉴定及基因克隆
发表日期:2017-04-24 09:34PM 阅览次数:
通过EMS诱变粳稻品种Kitaake获得两个遗传稳定的类病变突变体ugp8-1和ugp8-2。从生长2-3周开始,它们的叶片上都出现坏死的褐色斑点,并逐渐扩散至整张叶片,导致叶片的早衰死亡。和野生型比较,ugp8-2突变体花粉活力显著降低,株高、粒长、粒宽、每穗粒数、结实率和千粒重等均显著下降。遮光处理表明,ugp8褐色斑点的形成受自然光照的诱导。组织化学染色结果表明突变体叶片中有大量的死亡细胞,且多数组织细胞中聚集大量H2O2 和
。电子显微镜观察发现突变体叶细胞中叶绿体基质片层松散、排列不规则。生理指标测定发现,突变体的叶绿素、可溶性蛋白含量降低,过氧化物酶活性明显下降,丙二醛含量显著升高。遗传分析表明,这两个突变体的表型是受单个隐性核基因控制的。利用图位克隆策略及测序验证,发现这它们是编码尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶基因 (OsUGP8)的等位突变。ugp8-1突变体中OsUGP8编码区第312位G转换为A,导致终止密码子的产生; ugp8-2中该编码区第839位G转换为A,导致甘氨酸(G)突变为谷氨酸(E)。