加工马铃薯Atlantic无标记基因遗传转化体系建立

本研究以加工型专用品种Atlantic为实验材料，分别对影响其遗传转化的外植体、激素、预培养、菌液浓度、侵染及共培养等因素进行优化，建立了农杆菌介导的无标记基因高效转化体系，初步获得了转基因植株。研究结果表明，叶片和茎段均可作为马铃薯品种Atlantic的受体材料，转化过程中以预培养2 d-3 d后用OD600=0.5的菌液侵染10-15 min，在MSGI (添加有5 mg/L NAA和1.0 mg/L 6-BA)培养基上共培养2-3 d后，转入含有250 mg/L的MSGII (0.02 mg/L GA3和2.0 g/L ZT)的培养基上诱导生芽的遗传转化效率最高，其愈伤诱导率可达83.34%，芽分化率可达48.3%。通过该转化体系将抗马铃薯PVY病毒的基因导入马铃薯，获得无标记基因的转化植株，经PCR检测，初步确定已经将外源目的基因导入了马铃薯基因组中。