利用dCas9和组合gRNA策略在酵母中完成转录重编程
发表日期：2017-03-26 11:13PM 阅览次数：
转录重编程是活细胞中的一项根本过程，以适应环境和内源性的变化。为了灵活而及时的控制基因表达过程，且没有天然基因表达机制的干扰，大量的研究集中在发展合成生物学工具进行转录正交调控。最近，通过在靶基因转录起始位点简单RNA地引导，核酸酶缺陷型Cas9（dCas9）以用于控制靶基因的灵活工具。
在这项研究中，通过比较dCas9介导的转录重新编程的两个不同的系统，并把它们应用到基因控制的两条途径——面包酵母酿酒酵的类异戊二烯和三酰甘油生产中。通过在14中不同的酵母启动子上测试101种gRNA找到一种最优的组合。研究表明大量的gRNA-启动子组合对基因表达不起作用，但是仍有一些扰动效果高达三倍。效果最优的gRNA通过单独和组合方式被用于相关类异戊二烯和甘油三酯的生产。在这项研究中确定了两种组成型的诱导多重编辑策略明显改善类异戊二烯生产、提高TAG产量。
综上所述，研究发现了一个组成型和诱导型dCas9方法，并确定多元gRNA设计，可以显著影响酵母中异戊二烯和TAG的生产。研究还表明在14中天然酵母启动子中大量的gRNA不影响基因表达，暗示的gRNA设计工具和dCas9工程还需进一步优化。
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