紫花苜蓿转录因子NF-YB4的克隆及其耐盐作用的评价

核因子Y的B亚基（NF-YB）可以在植物的生长、发育和抗逆响应中调节多种基因的表达，在植物的各种生理活动中发挥重要作用。紫花苜蓿是重要的牧草，具有较强的抗逆能力。本研究从紫花苜蓿中克隆了一个NF-YB基因，即MsNF-YB4（Genbank 登录号为KX966286）。该基因的开放阅读框长度为405bp，编码134个氨基酸残基。经过比对发现，该基因与蒺藜苜蓿的NF-YB4（MtNF-YB4）在mRNA的编码区内同源性为92%，而在蛋白水平上的同源性为94%。通过比对分析，发现MsNF-YB4含有典型的NF-YB转录因子保守结构域。我们通过qPCR的方法对MsNF-YB4基因的表达模式进行了分析，结果发现，在盐碱和干旱胁迫下，在根瘤和根中的表达量显著上调，暗示该基因在盐碱和干旱胁迫的响应中发挥作用。我们构建了植物表达载体pCBC-MsNF-YB4，并通过农杆菌介导法获得了过量表达MsNF-YB4基因的转基因烟草。对T1代转基因烟草的耐盐性测试结果表明，MsNF-YB4基因的表达，提高了转基因烟草的耐盐性，转基因烟草可以在含有1.4% NaCl的培养基上生长。这些结果表明，MsNF-YB4在紫花苜蓿的盐胁迫响应中发挥重要作用。