KdLEC1及GbLEC1转基因棉花再生植株的获得

为了探究LEC1基因对棉花体细胞胚胎发生的影响，本研究利用地塞米松(DEX)诱导型表达载体pINDEX3，通过农杆菌分别介导大叶落地生根短缺的LEC1(KdLEC1)在新海15号下胚轴以及棉花的两个LEC1基因家族(GbLEC1A,GbLEC1B)和KdLEC1在新陆早33号胚性愈伤组织中的遗传转化，体胚诱导及再生过程，获得KdLEC1,GbLEC1A,GbLEC1B转基因植株。同时以KdLEC1转基因新海15号胚性愈伤组织系为试材，分别进行DEX和无DEX的悬浮诱导处理，实时定量PCR分析KdLEC1的相对表达量。研究表明：经为期13个月的植株再生过程和PCR鉴定，获得了两棵KdLEC1转基因新海15再生植株；分别获得了一棵PCR鉴定正确的KdLEC1，GbLEC1A，GbLEC1B转基因新陆早33再生植株，其再生周期约为10个月。实时定量PCR分析显示，KdLEC1的相对表达量在2.5倍和23倍之间波动，表明pINDEX3可以在不同水平诱导外源基因KdLEC1的表达。本研究旨在为LEC1在棉花体胚发生过程中的功能研究提供良好的材料，从而为棉花种质创新提供理论指导。